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基本信息
  • 货号VT205
  • 产品名称pLB零背景快速克隆试剂盒 (送感受态20支)
  • 品牌天根
  • 规格20 次
  • 目录单价780元
  • 保存温度-20℃
  • 产品特点pLB零背景快速克隆试剂盒是一种阳性选择克隆系统,可以高效克隆各种PCR产物和任何具有平末端或粘性末端的DNA片段。
详细内容

产品简介


pLB零背景快速克隆试剂盒是一种阳性选择克隆系统,可以高效克隆各种PCR产物和任何具有平末端或粘性末端的DNA片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的DNA片段都有效。阳性选择载体和插入片段连接仅需5 min即可获得超过95%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶(如:Pfu Polymerase)扩增的平末端PCR产物可直接连入克隆载体。由无校正活性的聚合酶(如:Taq Polymerase)或聚合酶混合物扩增的PCR产物在连接前需用试剂盒提供的热稳定DNA平端化酶进行末端平端化(7 min)即可。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。

试剂盒提供一个新颖的即用型阳性选择克隆载体pLB Vector。该载体含有致死基因(内含多克隆位点),多克隆位点插入外源片段会引起基因失活,因此只有转化了重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落。而自身环化的pLB Vector表达致死的毒性蛋白(无外源片段插入),转化后杀死大肠杆菌细胞。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选,极大地加速了克隆筛选进程。

 

产品特点


高效快速:零背景无需蓝白斑筛选,5 min快速连接

灵敏广泛:适合低浓度片段和长片段连接,适合平/粘末端连接

 

不同片段使用量


1.载体与片段的摩尔比控制在1:3-1:10,对于1kb以下的片段建议使用1:3的比例,1kb以上的片段建议使用1:7的比例。

2.请根据凝胶电泳或紫外分光光度计检测后的浓度和片段长度来计算其摩尔比。插入片段用量,可根据以下公式粗略计算:


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连接体系中35ng的载体,不同大小的PCR产物最佳加入量举例如下


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pLB Vector图谱


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反应体系


标准体系为10 μl体积,5 μl的反应体系也能取得很好的效果,试剂用量减半。

 

保存条件


请将试剂盒置于-20℃保存,避免反复冻融。


质量承诺

严格执行国际生产标准进行批量生产,所有产品均保证高质量.
质量有保证,产品正规合法.
大品牌保证,价格公道,倾力为国内外科研院校实验室提供优质的产品与服务项目.
品牌有保证,价格有优势

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